Kit de PCR en tempo real multiplexado do novo coronavirus (SARS-CoV-2).
Este kit de PCR altamente sensible e listo para usar está dispoñible en formato liofilizado (proceso de liofilización) para almacenamento a longo prazo.O kit pódese transportar e almacenar a temperatura ambiente e é estable durante un ano.Cada tubo de premestura contén todos os reactivos necesarios para a amplificación por PCR, incluíndo a transcriptase inversa, a polimerase Taq, os cebadores, as sondas e os substratos de dNTPs.Só precisa engadir 13 ul de auga destilada e 5 ul de modelo de ARN extraído, entón pódese executar e amplificar nos instrumentos de PCR.
A máquina qPCR debe cumprir os seguintes requisitos:
1. Coloca 8 tiras de tubo de PCR de 0,2 ml
2. Ten máis de catro canles de detección:
Canle | Excitación (nm) | Emisión (nm) | Colorantes precalibrados |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-VERMELLO |
4 | 630 | 670 | CY5 |
Plataformas de PCR:
Sistema de PCR en tempo real 7500, Biorad CF96, Sistema de detección de PCR en tempo real iCycler iQ™, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
A dificultade do transporte da cadea de frío do reactivo de detección de ácidos nucleicos do novo coronavirus
Cando os reactivos de detección de ácidos nucleicos convencionais se transportan a longa distancia, é necesario almacenar e transportar a cadea de frío (-20±5) ℃ para garantir que a enzima bioactiva dos reactivos permaneza activa.Para asegurarse de que a temperatura alcance o estándar, necesítanse varios quilogramos de xeo seco por cada caixa de reactivo de proba de ácido nucleico, incluso menos de 50 g, pero só pode durar dous ou tres días.Desde a perspectiva da práctica da industria, o peso real dos reactivos emitidos polos fabricantes é inferior ao 10% (ou moito menos que este valor) do recipiente.A maior parte do peso provén do xeo seco, as bolsas de xeo e as caixas de escuma, polo que o custo do transporte é moi elevado.
En marzo de 2020, o COVID-19 comezou a estalar a gran escala no estranxeiro e a demanda de reactivo de detección de ácidos nucleicos do novo coronavirus aumentou drasticamente.A pesar do alto custo de exportar os reactivos na cadea de frío, a maioría dos fabricantes aínda poden aceptalo debido á gran cantidade e ao alto beneficio.
Non obstante, coa mellora das políticas nacionais de exportación de produtos antipandémicos, así como a mellora do control nacional sobre o fluxo de persoas e a loxística, prodúcese unha extensión e incerteza no tempo de transporte dos reactivos, o que deu lugar a problemas destacados dos produtos causados. polo transporte.O tempo de transporte prolongado (o tempo de transporte de aproximadamente medio mes é moi común) leva a frecuentes fallos do produto cando o produto chega ao cliente.Isto provocou a maioría das empresas exportadoras de reactivos de ácido nucleico.
A tecnoloxía liofilizada para o reactivo de PCR axudou ao transporte do reactivo de detección de ácidos nucleicos do novo coronavirus en todo o mundo
Os reactivos de PCR liofilizados pódense transportar e almacenar a temperatura ambiente, o que non só pode reducir o custo de transporte, senón tamén evitar os problemas de calidade causados polo proceso de transporte.Polo tanto, liofilizar o reactivo é a mellor forma de resolver o problema do transporte de exportación.
A liofilización consiste en conxelar unha disolución en estado sólido e, a continuación, sublimar e separar o vapor de auga en condicións de baleiro.O soluto seco permanece no recipiente coa mesma composición e actividade.En comparación cos reactivos líquidos convencionais, o reactivo de detección de ácido nucleico Novel Coronavirus liofilizado de compoñentes completos producido por Liming Bio ten as seguintes características:
Estabilidade térmica moi forte:pódese tratar con soporte a 56 ℃ durante 60 días, e a morfoloxía e o rendemento do reactivo permanecen inalterados.
Temperatura normal de almacenamento e transporte:sen necesidade de cadea de frío, sen necesidade de almacenar a baixa temperatura antes de selar, liberar completamente o espazo de almacenamento en frío.
Listo para usar:liofilización de todos os compoñentes, sen necesidade de configuración do sistema, evitando a perda de compoñentes con alta viscosidade como encimas.
Obxectivos multiplexados nun só tubo:o obxectivo de detección abrangue o novo xene ORF1ab do coronavirus, o xene N e o xene S para evitar a xenovariación do virus.Para reducir os falsos negativos, o xene da RNase P humana utilízase como control interno, para satisfacer a necesidade clínica de control de calidade da mostra.