One World One Fight
─ Cooperación internacional para construír unha comunidade global de destino común que responde ao reto pandémico covid-19
A novela coronavirus que arrasaba polo mundo deu lugar a unha crise pandémica covid-19 en curso. A novela coronavirus non ten fronteiras, nin se aforrará ningún país desta batalla contra Covid-19. En resposta a esta pandemia covid-19 mundial, Liming Bio-Products Corp está a contribuír para apoiar o benestar das nosas comunidades globais.
O noso mundo enfróntase actualmente ao impacto sen precedentes da nova enfermidade de coronavirus 2019 (covid-19) pandemia. Ata a data, non hai ningún medicamento eficiente dispoñible para o tratamento desta enfermidade. Non obstante, desenvolvéronse moitas probas de diagnóstico para a detección de COVID-19. Estas probas baséanse en métodos moleculares ou serolóxicos para detectar o novo ácido nucleico específico de coronavirus ou biomarcadores de anticorpos. Como Covid-19 alcanzou un estado pandémico, o diagnóstico precoz da nova infección por coronavirus é fundamental para avaliar a propagación do virus e que o contén, pero aínda non existe unha proba perfecta para uso universal. Temos que saber que probas poderían usarse para o cribado, diagnóstico e seguimento da infección covid-19 e cales son as súas limitacións. É moi importante como facer un mellor uso destas ferramentas científicas e axudar a identificar e controlar a aparición desta difusión rápida e unha enfermidade grave.
O propósito da detección do coronavirus novo é determinar se un individuo que ten infección covid-19 ou un transportista asintótico que poida difundir o virus en silencio, para proporcionar información esencial para orientar a toma de decisións para o tratamento clínico. Estudos anteriores demostraron que o 70% das decisións clínicas dependen dos resultados das probas. Cando se usan diferentes métodos de detección, os requisitos dos kits de reactivos de detección tamén son diferentes.
Figura 1
Figura 1:Diagrama que mostra as etapas clave dos niveis xerais de biomarcadores durante o curso típico da infección covid-19. O eixe X indica o número de días de infección e o eixe y indica a carga viral, a concentración de antíxenos e a concentración de anticorpos en diferentes períodos. O anticorpo refírese a anticorpos IgM e IgG. Tanto a RT-PCR como a detección de antíxenos úsanse para detectar a presenza ou ausencia de coronavirus novo, que é evidencia directa para a detección precoz do paciente. Dentro dunha semana de infección viral, prefírese a detección de PCR ou a detección de antíxenos. Despois da novela infección por coronavirus durante uns 7 días, o anticorpo IgM contra o novel coronavirus aumentou gradualmente no sangue do paciente, pero a duración da existencia é curta e a súa concentración diminúe rapidamente. En contraste, o anticorpo IgG contra o virus aparece máis tarde, normalmente uns 14 días despois da infección polo virus. A concentración de IgG aumenta gradualmente e persiste un longo período no sangue. Así, se o IgM se detecta no sangue do paciente, significa que o virus infectouse recentemente, que é un marcador de infección precoz. Cando se detecta o anticorpo IgG no sangue do paciente, significa que a infección viral foi desde hai tempo. Tamén se chama infección tardía ou infección anterior. A miúdo vese en pacientes que están na fase de recuperación.
Os biomarcadores da novela coronavirus
A novela coronavirus é un virus de ARN, que está composto por proteínas e ácidos nucleicos. O virus invade o corpo hóspede (humano), entra nas células a través do sitio de unión correspondente ao receptor ACE2 e se replica en células do hóspede, facendo que o sistema inmunitario humano responda a invasores estranxeiros e produza anticorpos específicos. Polo tanto, os ácidos e antíxenos nucleicos do frasco e anticorpos específicos contra o coronavirus novedoso pódense utilizar teóricamente como biomarcadores específicos para a detección do coronavirus da novela. Para a detección de ácido nucleico, a tecnoloxía RT-PCR é a máis empregada, mentres que os métodos serolóxicos úsanse habitualmente para a detección dos novos anticorpos específicos do coronavirus. Actualmente, hai unha variedade de métodos de proba dispoñibles que podemos escoller para probar a infección covid-19 [1].
Principios básicos dos principais métodos de proba para o coronavirus novo
Moitas probas de diagnóstico para covid_19 están dispoñibles ata o momento, con máis kits de proba que reciben a aprobación baixo unha autorización de uso de emerxencia todos os días. Aínda que os novos desenvolvementos de proba que saen con tantos nomes e formatos diferentes, todas as probas actuais covid_19 dependen basicamente de dúas tecnoloxías principais: detección de ácido nucleico para o ARN viral e os inmunoensaios serolóxicos que detectan anticorpos específicos virales (IGM e IGG).
01. Detección de ácido nucleico
A reacción en cadea de transcrición inversa-polimerase (RT-PCR), a amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) e a secuenciación de última xeración (NGS) son os métodos comúns de ácido nucleico para a detección de ARN de coronavirus novidosos. RT-PCR é o primeiro tipo de proba para CoVID-19, recomendado tanto pola Organización Mundial da Saúde (OMS) como polo Centro de Control e Prevención de Enfermidades dos Estados Unidos (CDC).
02. Detección de anticorpos sonerolóxicos
O anticorpo é unha proteína protectora producida no corpo humano en resposta á infección por virus. O IgM é un tipo de anticorpo precoz mentres que IgG é un anticorpo de tipo posterior. A mostra de soro ou plasma normalmente examínase para a presenza de tipos específicos de IgM e IgG do anticorpo para a avaliación de fases agudas e convalescentes da infección covid-19. Estes métodos de detección baseados en anticorpos inclúen ensaio de inmunocromatografía de ouro coloidal, inmunocromatografía de látex ou microsfera fluorescente, ensayo inmunosorbente ligado á enzima (ELISA) e ensaio de quimioluminescencia.
03. Detección de antíxenos virais
O antíxeno é unha estrutura do virus recoñecido polo corpo humano que desencadea o sistema de defensa inmune para producir anticorpos para limpar o virus do sangue e dos tecidos. Un antíxeno viral presente no virus pode ser dirixido e detectado mediante inmunoensayo. Do mesmo xeito que o ARN viral, os antíxenos virais tamén están presentes no tracto respiratorio de individuos infectados e pódense usar para diagnosticar a fase aguda da infección covid-19. Polo tanto, a miúdo recoméndase recoller exemplares respiratorios superiores como saliva, tampóns nasofaríngeos e orofaringes, esputo de tose profunda, fluído de lavado broncoalveolar (BALF) para probas de antíxenos iniciais.
Selección de métodos de proba para coronavirus novedoso
A selección dun método de proba implica moitos factores, incluíndo a configuración clínica, probas de control de calidade, tempo de cambio, custos de proba, métodos de recollida de mostras, requisitos técnicos de persoal de laboratorio, requisitos de instalacións e equipos. A detección de ácidos nucleicos ou antíxenos virais é proporcionar evidencia directa da presenza dos virus e confirmar o diagnóstico de nova infección por coronavirus. Aínda que hai moitos métodos para a detección de antíxenos, a sensibilidade de detección do novo coronavirus é teoricamente inferior á da amplificación RT-PCR. A proba de anticorpos é a detección de anticorpos antivirus producidos no corpo humano, que se atrasa no tempo e a miúdo non se pode usar para a detección precoz durante a fase aguda da infección por virus. A configuración clínica para as aplicacións de detección pode variar e os sitios de recollida de mostras tamén poden ser diferentes. Para a detección de ácidos e antíxenos nucleicos virais, o exemplar debe ser recollido no tracto respiratorio onde está presente o virus, como cotonetes nasofaringes, cotonetas orofaríngicos, esputo ou fluído de lavado broncoalveolar (BALF). Para a detección baseada en anticorpos, hai que recoller e examinar o exemplar de sangue para a presenza de anticorpos antivirus específicos (IgM/IgG). Non obstante, os resultados das probas de anticorpos e ácidos nucleicos poden complementarse. Por exemplo, cando o resultado da proba é o ácido nucleico-negativo, IgM-negativo pero IgG-positivo, estes resultados indican que o paciente non leva actualmente o virus, pero foi recuperado da novela infección por coronavirus. [2]
Vantaxes e desvantaxes das novas probas de coronavirus
No protocolo de diagnóstico e tratamento para a nova pneumonía de coronavirus (Versión de proba7) (publicada pola Comisión Nacional de Saúde e a Administración estatal de medicina tradicional chinesa o 3 de marzo de 2020), a proba de ácido nucleico úsase como método estándar de ouro para o diagnóstico da novela Infección por coronavirus, mentres que as probas de anticorpos tamén se consideran un dos métodos de confirmación para o diagnóstico.
Achados patóxenos e serolóxicos
(1) Buscados patóxenos: pódese detectar ácido núcleo de coronavirus novedoso en cotonetes nasofaríngeos, esputo, secrecións de vías respiratorias inferiores, sangue, feces e outros exemplares mediante métodos RT-PCRAND/ou NGS. É máis preciso se se obtén exemplares de vías respiratorias inferiores (extracción de esputo ou tracto de aire). Os exemplares deberán presentarse para facer probas o antes posible despois da recollida.
(2) Conclusións serolóxicas: o IgM específico do virus NCP faise detectable ao redor de 3-5 días despois do inicio; A IgG alcanza unha valoración dun aumento de polo menos 4 veces durante a convalescencia en comparación coa fase aguda.
Non obstante, a selección de métodos de proba depende de lugares xeográficos, regulacións médicas e configuracións clínicas. Nos EUA, a NIH emitiu as directrices de tratamento da enfermidade de Coronavirus 2019 (COVID-19) (actualización do sitio: 21 de abril de 2019) e a FDA emitiu a política para probas de diagnóstico para a enfermidade de coronavirus-2019 durante a emerxencia de saúde pública (emitida o 16 de marzo de 2020 ), en que as probas serolóxicas dos anticorpos IgM/IgG seleccionados só como proba de cribado.
Método de detección de ácido nucleico
RT_PCR é unha proba de ácido nucleico altamente sensible deseñada para detectar se o novo ARN de coronavirus está presente ou non no exemplar respiratorio ou outro. Un resultado positivo da proba de PCR significa a presenza de novo ARN de coronavirus na mostra para confirmar a infección covid-19. Un resultado negativo da proba de PCR non significa a ausencia da infección polo virus porque podería verse afectada pola mala calidade da mostra ou o punto de tempo da enfermidade na fase recuperada, etc. Aínda que RT-PCR é unha proba altamente sensible, ten varios inconvenientes. As probas de RT-PCR poden ser intensivas en traballo e que levan moito tempo, dependen crucialmente da alta calidade da mostra. Isto pode ser un reto porque a cantidade de ARN viral non só varía tremendamente entre diferentes pacientes, senón que tamén pode variar dentro do mesmo paciente dependendo dos momentos cando se recolle a mostra, así como as fases de infección ou o inicio dos síntomas clínicos. A detección da novela coronavirus require exemplares de alta calidade que conteñan unha cantidade suficiente de ARN viral intacto.
A proba RT-PCR pode dar un resultado negativo incorrecto (falso negativo) para algúns pacientes que teñen infección covid-19. Como sabemos, os principais sitios de infección do novel coronavirus están situados no pulmón e no tracto respiratorio inferior, como os alveolos e os bronquios. Polo tanto, o exemplar de esputo dunha tose profunda ou do fluído de lavado broncoalveolar (BALF) considerado que ten a maior sensibilidade para a detección viral. Non obstante, na práctica clínica, as mostras adoitan recollerse das vías respiratorias superiores mediante utilizacións nasofaríngeas ou orofaríngeas. Recoller estes exemplares non só é incómodo para os pacientes, senón que tamén require persoal especialmente adestrado. Para que a mostraxe sexa menos invasiva ou máis fácil, nalgúns casos os pacientes poden recibir un tampón oral e permitirlles tomar unha mostra da mucosa bucal ou da lingua que se fan. Sen ARN viral suficiente, RT-QPCR pode devolver un resultado de proba falsa-negativa. Na provincia de Hubei, China, a sensibilidade RT-PCR na detección inicial só se informou de aproximadamente un 30%-50%, cunha media do 40%. A elevada taxa de falso-negativo foi probablemente causada por unha mostraxe insuficiente.
Ademais, a proba RT-PCR require persoal altamente adestrado para realizar pasos de extracción de ARN complexos e procedemento de amplificación de PCR. Tamén require un maior nivel de protección de bioseguridade, instalación de laboratorio especial e instrumento PCR en tempo real. En China, a proba RT-PCR para a detección de CovID-19 debe realizarse en laboratorios de nivel 2 de bioseguridade (BSL-2), con protección do persoal empregando a práctica de nivel 3 de bioseguridade (BSL-3). Baixo estes requisitos, desde principios de xaneiro a principios de febreiro de 2020, a capacidade do laboratorio CDC de China Wuhan só foi capaz de detectar algúns centos de casos ao día. Normalmente, isto non sería un problema ao probar outras enfermidades infecciosas. Non obstante, cando se trata dunha pandemia global como o COVID-19 con potencialmente millóns de persoas a probar, RT-PCR convértese nun problema crítico debido aos seus requisitos para instalacións especiais de laboratorio ou equipos técnicos. Estas desvantaxes poden limitar o RT-PCR para ser usado como ferramenta eficiente para o cribado e tamén pode levar a atrasos nos informes de resultados das probas.
Método de detección de anticorpos serolóxicos
Co avance do curso da enfermidade, especialmente nas etapas medias e tardías, a taxa de detección de anticorpos é moi alta. Un estudo no Hospital Central do Sur de Wuhan demostrou que a taxa de detección de anticorpos podería alcanzar máis do 90% na terceira semana de infección covid-19. Ademais, o anticorpo é o produto da resposta inmune humana contra a novela coronavirus. A proba de anticorpos ofrece varias vantaxes sobre RT-PCR. En primeiro lugar, o anticorpo serolóxico proba sinxelo e rápido. As probas de fluxo lateral de anticorpos pódense usar para o punto de atención para ofrecer un resultado en 15 minutos. En segundo lugar, o obxectivo detectado pola proba serolóxica é o anticorpo, que se sabe que é moito máis estable que o ARN viral. Durante a recollida, transporte, almacenamento e probas, os exemplares para probas de anticorpos son xeralmente máis estables que os exemplares para RT-PCR. En terceiro lugar, debido a que o anticorpo distribúese uniformemente na circulación sanguínea, hai menos variación de mostraxe en comparación coa proba de ácido nucleico. O volume de mostra requirido para a proba de anticorpos é relativamente pequeno. Por exemplo, 10 microlitro de sangue de dedo é suficiente para o seu uso na proba de fluxo lateral anticorpo.
En xeral, a proba de anticorpos elíxese como ferramenta de suplemento para a detección de ácidos nucleicos para mellorar a taxa de detección do novo coronavirus durante os cursos da enfermidade. Cando a proba de anticorpos se usa xunto cunha proba de ácido nucleico, pode aumentar a precisión do ensaio para o diagnóstico de CoVID19 reducindo os resultados potenciais falsos-positivos e falsos-negativos. A guía de operación actual non recomenda usar dous tipos de proba por separado como formato de detección independente, pero debe usarse como formato combinado. [2]
Figura 2:A correcta interpretación do ácido nucleico e os resultados das probas de anticorpos para a detección de novas infeccións por coronavirus
Figura 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novel Coronavirus IgM/IgG Anticory Kit de proba rápida (StrongStep®Sars-Cov-2 IgM/IgG Anticory Test, inmunocromatografía de látex)
Figura 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Novel coronavirus (SARS-Cov-2) Kit PCR en tempo real multiplex (detección de tres xenes, método de sonda fluorescente).
Nota:Este kit PCR altamente sensible e listo para o seu uso está dispoñible en formato liofilizado (proceso de secado de conxelación) para o almacenamento a longo prazo. O kit pódese transportar e almacenar a temperatura ambiente e é estable durante un ano. Cada tubo de premezcla contén todos os reactivos necesarios para a amplificación da PCR, incluíndo a inversa-transcriptase, Taq polimerase, cebadores, sondas e substratos DNTPS. Os usuarios poden simplemente reconstituír a mestura engadindo auga de calidade PCR xunto co modelo e logo cargar nun instrumento PCR para executar a amplificación.
En resposta ao novo brote de coronavirus, Liming Bio-Products Co., Ltd. traballou rapidamente para desenvolver dous kits de diagnóstico para permitir que os laboratorios clínicos e de saúde pública diagnosticen rapidamente a infección covid-19. Estes kits son moi adecuados para o seu uso para o cribado a gran escala en países e rexións onde o novo brote de coronavirus se estende rapidamente e para proporcionar diagnóstico e confirmación para a infección covid-19. Estes kits son só para o seu uso baixo autorización de uso de emerxencia non notificada (PEUA). As probas están limitadas a laboratorios certificados segundo a normativa das autoridades nacionais ou locais.
Método de detección de antíxenos
1. A detección de antíxeno viral clasifícase na mesma categoría de detección directa que a detección de ácido nucleico. Estes métodos de detección directa buscan evidencias de patóxenos virais no exemplar e pódense usar para o diagnóstico de confirmación. Non obstante, o desenvolvemento de kits de detección de antíxenos require unha alta calidade de anticorpos monoclonais con forte afinidade e alta sensibilidade capaz de recoñecer e capturar virus patóxenos. Normalmente leva máis de seis meses para seleccionar e optimizar un anticorpo monoclonal adecuado para o seu uso na preparación do kit de detección de antíxenos.
2. Actualmente, os reactivos para a detección directa do novel coronavirus aínda están en fase de investigación e desenvolvemento. Polo tanto, ningún kit de detección de antíxenos foi validado clínicamente e dispoñible comercialmente. Aínda que se informou anteriormente de que unha empresa de diagnóstico en Shenzhen desenvolveu un kit de detección de antíxenos e probado clínicamente en España, a fiabilidade e precisión do ensaio non se puido validar debido á presenza de problemas de calidade do reactivo. Ata a data, a NMPA (antiga China FDA) non aprobou aínda ningún kit de detección de antíxenos para uso clínico. En conclusión, desenvolvéronse unha variedade de métodos de detección. Cada método ten as súas vantaxes e limitacións. Os resultados de diferentes métodos pódense usar para a verificación e complemento.
3. Producir un kit de proba CoVID-19 de calidade depende fortemente da optimización durante a investigación e desenvolvemento. Liming Bio-Product Co., Ltd. Os kits de proba son necesarios para cumprir os estándares de fabricación e control de calidade rigorosos para asegurarse de que proporcionen os máis altos niveis de rendemento e coherencia. Os científicos de Liming Bio-Product Co., Ltd. teñen máis de vinte anos de experiencia no deseño, proba e optimización de kits de diagnóstico in vitro para garantir o maior nivel de rendemento na cuantificación analítica.
Durante a pandemia Covid-19, o goberno chinés afrontou o aumento da enorme demanda de materiais de prevención de epidémicos nos hotspots internacionais. O 5 de abril, na conferencia de prensa do mecanismo de prevención e control conxunto do Consello de Estado "fortalecendo a xestión da calidade dos materiais médicos e regulando a orde do mercado", fan de Jiang, un inspector de primeiro nivel do Departamento de Comercio Exterior do Ministerio do comercio, dixo: "A continuación, centraremos os nosos esforzos en dous aspectos, en primeiro lugar, para acelerar o apoio de máis materiais médicos necesarios pola comunidade internacional e, tamén, para mellorar o control, a regulación e a xestión dos produtos. Faremos a contribución de China a responder conxuntamente á epidemia global e construír unha comunidade cun futuro compartido para a humanidade.
Figura 5:Liming Bio-Products Co., a novela de Coronavirus Reigent obtivo o certificado de rexistro da UE
O certificado honorario
Houshenshan
Figura 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. Apoiou o hospital de montaña Wuhan Vulcan (Houshenshan) para loitar contra a epidemia Covid-19 e foi galardoado co certificado honorario da Cruz Vermella de Wuhan. O Hospital de Montaña de Wuhan Vulcan é o hospital máis famoso de China especializado no tratamento de covid severos - 19 pacientes.
A medida que a novela brote de coronavirus segue estendéndose polo mundo, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. está a piques de apoiar e axudar ás comunidades en todo o mundo coas nosas innovadoras tecnoloxías para loitar contra esta ameaza global sen precedentes. A proba rápida da infección covid-19 é unha parte crítica para abordar esta ameaza. Seguimos contribuíndo dun xeito significativo proporcionando plataformas de diagnóstico de alta calidade en mans dos traballadores sanitarios de primeira liña para que a xente poida recibir os resultados das probas críticas que precisan. Liming Bio-Products Co., Ltd. Os esforzos na batalla contra a pandemia Covid-19 son contribuír ás nosas tecnoloxías, experiencias e coñecementos para comunidades internacionais para a construción dunha comunidade global de destino.
Prensa longa ~ escanear e séguenos
Correo electrónico: sales@limingbio.com
Sitio web: https://limingbio.com
Tempo de publicación: maio-01-2020
