Un mundo, unha loita
─Cooperación internacional para construír unha comunidade global de destino común respondendo ao reto da pandemia de COVID-19
O novo coronavirus que atravesou o mundo provocou unha crise pandémica global de COVID-19 en curso.O novo coronavirus non ten fronteiras, ningún país se librará desta batalla contra o COVID-19.En resposta a esta pandemia mundial de COVID-19, Liming Bio-Products Corp está facendo contribucións para apoiar o benestar das nosas comunidades globais.
O noso mundo enfróntase actualmente ao impacto sen precedentes da pandemia da nova enfermidade coronavirus 2019 (COVID-19).Ata a data, non hai un medicamento eficaz dispoñible para o tratamento desta enfermidade.Non obstante, desenvolvéronse moitas probas de diagnóstico para a detección de COVID-19.Estas probas baséanse en métodos moleculares ou serolóxicos para detectar o ácido nucleico específico do novo coronavirus ou os biomarcadores de anticorpos.Como o COVID-19 alcanzou un estado de pandemia, o diagnóstico precoz da infección polo novo coronavirus é fundamental para avaliar a propagación do virus e contelo, pero aínda non existe unha proba perfecta para o seu uso universal.Temos que saber que probas poderían utilizarse para a detección, o diagnóstico e o seguimento da infección por COVID-19, e cales son as súas limitacións.É moi importante facer un mellor uso destas ferramentas científicas e axudar a identificar e controlar a aparición desta enfermidade grave e de rápida propagación.
O obxectivo da detección do novo coronavirus é determinar se un individuo que ten unha infección por COVID-19 ou un portador asintótico que pode propagar o virus en silencio, para proporcionar información esencial para guiar a toma de decisións para o tratamento clínico.Estudos anteriores demostraron que o 70% das decisións clínicas dependen dos resultados das probas.Cando se usan diferentes métodos de detección, os requisitos dos kits de reactivos de detección tamén son diferentes.
Figura 1
Figura 1:Diagrama que mostra as etapas clave dos niveis xerais de biomarcadores durante o curso típico da infección por COVID-19.O eixe X indica o número de días de infección e o eixe Y indica a carga viral, a concentración de antíxenos e a concentración de anticorpos en diferentes períodos.Anticorpo refírese a anticorpos IgM e IgG.Tanto a RT-PCR como a detección de antíxenos úsanse para detectar a presenza ou ausencia do novo coronavirus, o que é unha evidencia directa para a detección precoz do paciente.Dentro dunha semana de infección viral, é preferible a detección por PCR ou a detección de antíxenos.Despois da infección polo novo coronavirus durante uns 7 días, o anticorpo IgM contra o novo coronavirus aumentou gradualmente no sangue do paciente, pero a duración da existencia é curta e a súa concentración diminúe rapidamente.Pola contra, o anticorpo IgG contra o virus aparece máis tarde, normalmente uns 14 días despois da infección polo virus.A concentración de IgG aumenta gradualmente e persiste un longo período no sangue.Así, se se detecta a IgM no sangue do paciente, significa que o virus se infectou recentemente, o que é un marcador de infección precoz.Cando se detecta o anticorpo IgG no sangue do paciente, significa que a infección viral leva un tempo.Tamén se di infección tardía ou infección previa.Moitas veces vese en pacientes que están en fase de recuperación.
Os biomarcadores do novo coronavirus
O novo coronavirus é un virus de ARN, que está composto por proteínas e ácidos nucleicos.O virus invade o corpo hóspede (humano), entra nas células a través do receptor ACE2 correspondente ao sitio de unión e replícase nas células hóspedes, o que fai que o sistema inmunitario humano responda aos invasores estranxeiros e produza anticorpos específicos.Polo tanto, os ácidos nucleicos e os antíxenos dos frascos e os anticorpos específicos contra o novo coronavirus pódense utilizar teoricamente como biomarcadores específicos para a detección do novo coronavirus.Para a detección de ácidos nucleicos, a tecnoloxía RT-PCR é a máis utilizada, mentres que os métodos serolóxicos úsanse habitualmente para a detección dos novos anticorpos específicos do coronavirus.Actualmente, hai unha variedade de métodos de proba dispoñibles que podemos escoller para probar a infección por COVID-19 [1].
Principios básicos dos principais métodos de proba para o novo coronavirus
Ata o momento están dispoñibles moitas probas de diagnóstico para COVID_19, con máis kits de proba que reciben a aprobación baixo unha autorización de uso de emerxencia todos os días.Aínda que os novos desenvolvementos de probas saen con tantos nomes e formatos diferentes, todas as probas actuais de COVID_19 baséanse basicamente en dúas tecnoloxías principais: detección de ácidos nucleicos para o ARN viral e inmunoensaios serolóxicos que detectan anticorpos específicos do virus (IgM e IgG).
01. Detección de ácidos nucleicos
A reacción en cadea da polimerase de transcrición inversa (RT-PCR), a amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) e a secuenciación de próxima xeración (NGS) son os métodos comúns de ácidos nucleicos para a detección do novo ARN do coronavirus.A RT-PCR é o primeiro tipo de proba para a COVID-19, recomendada tanto pola Organización Mundial da Saúde (OMS) como polo Centro de Control e Prevención de Enfermidades dos Estados Unidos (CDC).
02.Detección serolóxica de anticorpos
O anticorpo é unha proteína protectora producida no corpo humano en resposta á infección polo virus.A IgM é un tipo de anticorpo precoz mentres que a IgG é un tipo de anticorpo posterior.A mostra de soro ou plasma adoita examinarse para detectar a presenza de tipos específicos de IgM e IgG do anticorpo para a avaliación das fases aguda e de convalecencia da infección por COVID-19.Estes métodos de detección baseados en anticorpos inclúen o ensaio de inmunocromatografía de ouro coloidal, a inmunocromatografía de látex ou de microesferas fluorescentes, o ensaio de inmunoabsorción ligado a encimas (ELISA) e o ensaio de quimioluminiscencia.
03.Detección de antíxenos virales
O antíxeno é unha estrutura do virus recoñecida polo corpo humano que activa o sistema de defensa inmune para producir anticorpos para eliminar o virus do sangue e dos tecidos.Un antíxeno viral presente no virus pódese dirixir e detectar mediante inmunoensaio.Do mesmo xeito que o ARN viral, os antíxenos virais tamén están presentes no tracto respiratorio dos individuos infectados e pódense usar para diagnosticar a fase aguda da infección por COVID-19.Polo tanto, a miúdo recoméndase recoller mostras das vías respiratorias superiores como saliva, hisopos nasofarínxeos e orofarínxeos, esputo de tose profunda, líquido de lavado broncoalveolar (BALF) para a proba inicial do antíxeno.
Selección de métodos de proba para o novo coronavirus
A selección dun método de proba implica moitos factores, incluíndo a configuración clínica, o control de calidade das probas, o tempo de resposta, os custos das probas, os métodos de recollida de mostras, os requisitos técnicos do persoal do laboratorio, os requisitos das instalacións e dos equipos.A detección de ácidos nucleicos ou antíxenos virais é para proporcionar evidencia directa da presenza dos virus e confirmar o diagnóstico da nova infección por coronavirus.Aínda que hai moitos métodos para a detección de antíxenos, a súa sensibilidade de detección do novo coronavirus é teoricamente menor que a da amplificación por RT-PCR.A proba de anticorpos é a detección de anticorpos antivirus producidos no corpo humano, que está atrasado no tempo e moitas veces non se pode utilizar para a detección precoz durante a fase aguda da infección polo virus.A configuración clínica das aplicacións de detección pode variar e os lugares de recollida de mostras tamén poden ser diferentes.Para a detección de ácidos nucleicos e antíxenos virais, a mostra debe ser recollida no tracto respiratorio onde está presente o virus, como hisopos nasofarínxeos, hisopos orofarínxeos, esputo ou líquido de lavado broncoalveolar (BALF).Para a detección baseada en anticorpos, é necesario recoller mostras de sangue e examinar a presenza de anticorpos antivirus específicos (IgM/IgG).Non obstante, os resultados das probas de anticorpos e ácidos nucleicos poden complementarse entre si.Por exemplo, cando o resultado da proba é o ácido nucleico negativo, IgM negativo pero IgG positivo, estes resultados indican que o paciente actualmente non porta o virus, pero que se recuperou da nova infección por coronavirus.[2]
Vantaxes e inconvenientes das probas de novo coronavirus
No Protocolo de diagnóstico e tratamento para a pneumonía por novo coronavirus (versión de proba 7) (publicado pola Comisión Nacional de Saúde e a Administración Estatal de Medicina Tradicional Chinesa o 3 de marzo de 2020), as probas de ácidos nucleicos úsanse como método estándar de ouro para o diagnóstico da novela. infección por coronavirus, mentres que a proba de anticorpos tamén se considera un dos métodos de confirmación para o diagnóstico.
Achados patóxenos e serolóxicos
(1) Achados patóxenos: o novo ácido nucleico do coronavirus pódese detectar en hisopos nasofarínxeos, esputo, secrecións do tracto respiratorio inferior, sangue, feces e outros exemplares mediante métodos RT-PCR e/ou NGS.É máis preciso se os exemplares se obteñen das vías respiratorias inferiores (extracción de esputo ou vía aérea).As mostras deben enviarse a proba o antes posible despois da recollida.
(2) Achados serolóxicos: a IgM específica do virus NCP faise detectable uns 3-5 días despois do inicio;A IgG alcanza unha titulación de polo menos 4 veces durante a convalecencia en comparación coa fase aguda.
Non obstante, a selección dos métodos de proba depende da localización xeográfica, da normativa médica e da configuración clínica.Nos Estados Unidos, o NIH emitiu as directrices de tratamento da enfermidade por coronavirus 2019 (COVID-19) (actualización do sitio: 21 de abril de 2020) e a FDA emitiu a Política de probas de diagnóstico para a enfermidade de coronavirus 2019 durante a emerxencia de saúde pública (publicada o 16 de marzo de 2020). ), na que se seleccionan probas serolóxicas dos anticorpos IgM/IgG só como proba de cribado.
Método de detección de ácidos nucleicos
RT_PCR é unha proba de ácido nucleico altamente sensible deseñada para detectar se o novo ARN do coronavirus está presente ou non na mostra respiratoria ou doutro tipo.Un resultado positivo da proba de PCR significa a presenza de novo ARN de coronavirus na mostra para confirmar a infección por COVID-19.Un resultado negativo da proba de PCR non significa a ausencia da infección polo virus porque podería verse afectado pola mala calidade da mostra ou o punto de tempo da enfermidade na fase de recuperación, etc.Aínda que a RT-PCR é unha proba moi sensible, ten varios inconvenientes.As probas de RT-PCR poden ser laboriosas e lentas, e dependen fundamentalmente da alta calidade da mostra.Isto pode ser un desafío porque a cantidade de ARN viral non só varía enormemente entre diferentes pacientes, senón que tamén pode variar dentro do mesmo paciente dependendo dos momentos nos que se recolle a mostra, así como das fases de infección ou da aparición dos síntomas clínicos.A detección do novo coronavirus require mostras de alta calidade que conteñan unha cantidade suficiente de ARN viral intacto.
A proba de RT-PCR pode dar un resultado negativo incorrecto (falso negativo) para algúns pacientes que teñen unha infección por COVID-19.Como sabemos, os principais sitios de infección do novo coronavirus localízanse no pulmón e nas vías respiratorias inferiores, como os alvéolos e os bronquios.Polo tanto, a mostra de esputo dunha tose profunda ou o fluído de lavado broncoalveolar (BALF) considerouse que ten a maior sensibilidade para a detección viral.Non obstante, na práctica clínica, as mostras adoitan recollerse das vías respiratorias superiores mediante hisopos nasofarínxeos ou orofarínxeos.A recollida destes exemplares non só é incómoda para os pacientes, senón que tamén require persoal especialmente adestrado.Para que a toma de mostras sexa menos invasiva ou máis sinxela, nalgúns casos pódeselle administrar aos pacientes un hisopo oral e permitirlles tomar unha mostra da mucosa bucal ou da lingua.Sen suficiente ARN viral, a RT-qPCR pode devolver un resultado falso negativo.Na provincia de Hubei, China, a sensibilidade da RT-PCR na detección inicial só se informou dun 30%-50%, cunha media do 40%.A alta taxa de falsos negativos probablemente foi causada por unha mostraxe insuficiente.
Ademais, a proba de RT-PCR require persoal altamente capacitado para realizar pasos complexos de extracción de ARN e procedementos de amplificación por PCR.Tamén require un maior nivel de protección de bioseguridade, instalacións especiais de laboratorio e instrumentos de PCR en tempo real.En China, a proba RT-PCR para a detección de COVID-19 debe realizarse en laboratorios de nivel de bioseguridade 2 (BSL-2), coa protección do persoal mediante a práctica de nivel de bioseguridade 3 (BSL-3).Segundo estes requisitos, desde principios de xaneiro ata principios de febreiro de 2020, a capacidade do laboratorio CDC de China Wuhan só puido detectar uns centos de casos por día.Normalmente, isto non sería un problema cando se proban outras enfermidades infecciosas.Non obstante, cando se trata dunha pandemia global como a COVID-19 con potencialmente millóns de persoas para ser probadas, a RT-PCR convértese nun problema crítico debido aos seus requisitos para instalacións especiais de laboratorio ou equipos técnicos.Estas desvantaxes poden limitar o uso da RT-PCR como ferramenta eficaz para a detección e tamén poden provocar atrasos nos informes dos resultados das probas.
Método serolóxico de detección de anticorpos
Co progreso do curso da enfermidade, especialmente nas fases medias e finais, a taxa de detección de anticorpos é moi alta.Un estudo realizado no Hospital Central Sur de Wuhan mostrou que a taxa de detección de anticorpos podería alcanzar máis do 90% na terceira semana de infección por COVID-19.Ademais, o anticorpo é o produto da resposta inmune humana contra o novo coronavirus.A proba de anticorpos ofrece varias vantaxes sobre a RT-PCR.En primeiro lugar, as probas serolóxicas de anticorpos son sinxelas e rápidas.As probas de fluxo lateral de anticorpos pódense utilizar para o punto de atención para obter un resultado en 15 minutos.En segundo lugar, a diana detectada pola proba serolóxica é o anticorpo, que se sabe que é moito máis estable que o ARN viral.Durante a recollida, transporte, almacenamento e probas, as mostras para probas de anticorpos son xeralmente máis estables que as mostras para RT-PCR.En terceiro lugar, porque o anticorpo está distribuído uniformemente na circulación sanguínea, hai menos variación de mostraxe en comparación coa proba de ácido nucleico.O volume de mostra necesario para a proba de anticorpos é relativamente pequeno.Por exemplo, 10 microlitros de sangue pinchada no dedo son suficientes para usar na proba de fluxo lateral de anticorpos.
En xeral, a proba de anticorpos elíxese como unha ferramenta complementaria para a detección de ácidos nucleicos para mellorar a taxa de detección do novo coronavirus durante o curso da enfermidade.Cando a proba de anticorpos se usa xunto cunha proba de ácido nucleico, pode aumentar a precisión da proba para o diagnóstico de COVID19 ao reducir os posibles resultados falsos positivos e falsos negativos.A guía de operación actual non recomenda usar dous tipos de proba por separado como un formato de detección independente, pero debería usarse como un formato combinado.[2]
Figura 2:A interpretación correcta dos resultados das probas de ácidos nucleicos e anticorpos para a detección da nova infección por coronavirus
Figura 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. - Kit de proba rápida dual de anticorpos IgM/IgG novo coronavirus (StrongStep®Proba rápida de anticorpos IgM/IgG SARS-CoV-2, inmunocromatografía de látex)
Figura 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. - StrongStep®Kit de PCR en tempo real multiplexado do novo coronavirus (SARS-CoV-2) (detección de tres xenes, método de sonda fluorescente).
Nota:Este kit de PCR altamente sensible e listo para usar está dispoñible en formato liofilizado (proceso de liofilización) para almacenamento a longo prazo.O kit pódese transportar e almacenar a temperatura ambiente e é estable durante un ano.Cada tubo de premestura contén todos os reactivos necesarios para a amplificación da PCR, incluíndo a transcriptase inversa, polimerase Taq, cebadores, sondas e substratos de dNTPs. Os usuarios poden simplemente reconstituír a mestura engadindo auga de grao PCR xunto co modelo e despois cargar. en un instrumento de PCR para realizar la amplificación.
En resposta ao novo brote de coronavirus, Liming Bio-Products Co., Ltd. traballou rapidamente para desenvolver dous kits de diagnóstico para que os laboratorios clínicos e de saúde pública poidan diagnosticar rapidamente a infección por COVID-19.Estes kits son moi axeitados para o seu uso para a detección a gran escala en países e rexións onde o brote do novo coronavirus se estende rapidamente e para proporcionar diagnóstico e confirmación da infección por COVID-19.Estes kits só se poden usar baixo a Autorización de uso de emerxencia notificada previamente (PEUA).As probas están limitadas a laboratorios certificados segundo as normativas das autoridades nacionais ou locais.
Método de detección de antíxenos
1. A detección de antíxenos virales clasifícase na mesma categoría de detección directa que a detección de ácidos nucleicos.Estes métodos de detección directa buscan evidencias de patóxenos virais na mostra e pódense utilizar para confirmar o diagnóstico.Non obstante, o desenvolvemento de kits de detección de antíxenos require de anticorpos monoclonais de alta calidade con forte afinidade e alta sensibilidade capaces de recoñecer e capturar virus patóxenos.Normalmente leva máis de seis meses seleccionar e optimizar un anticorpo monoclonal axeitado para o seu uso na preparación do kit de detección de antíxenos.
2. Actualmente, os reactivos para a detección directa do novo coronavirus aínda están en fase de investigación e desenvolvemento.Polo tanto, ningún kit de detección de antíxenos foi validado clínicamente e dispoñible comercialmente.Aínda que se informou previamente de que unha empresa de diagnóstico en Shenzhen desenvolveu un kit de detección de antíxenos e probou clínicamente en España, a fiabilidade e precisión do ensaio non se puido validar debido á presenza de problemas de calidade dos reactivos.Ata a data, a NMPA (antiga FDA de China) aínda non aprobou ningún kit de detección de antíxenos para uso clínico.En conclusión, desenvolvéronse unha variedade de métodos de detección.Cada método ten as súas vantaxes e limitacións.Os resultados de diferentes métodos pódense utilizar para a verificación e o complemento.
3. A produción dun kit de proba de COVID-19 de calidade depende en gran medida da optimización durante a investigación e o desenvolvemento.Liming Bio-Product Co., Ltd.Os kits de proba deben cumprir estándares estritos de fabricación e control de calidade para garantir que proporcionan os máis altos niveis de rendemento e consistencia.Os científicos de Liming Bio-Product Co., Ltd. teñen máis de vinte anos de experiencia no deseño, proba e optimización de kits de diagnóstico in vitro para garantir o maior nivel de rendemento na cuantificación analítica.
Durante a pandemia de COVID-19, o goberno chinés enfrontouse ao aumento da enorme demanda de materiais de prevención de epidemias nos puntos quentes internacionais.O 5 de abril, na rolda de prensa do Mecanismo conxunto de prevención e control do Consello de Estado "Fortalecemento da xestión da calidade dos materiais médicos e regulación da orde do mercado", Jiang Fan, inspector de primeiro nivel do Departamento de Comercio Exterior do Ministerio. of Commerce, dixo: "A continuación, centraremos os nosos esforzos en dous aspectos, en primeiro lugar, para acelerar o apoio de máis materiais médicos necesarios pola comunidade internacional, e tamén para mellorar o control de calidade, a regulación e a xestión dos produtos. Faremos a contribución de China para responder conxuntamente á epidemia mundial e construír unha comunidade cun futuro compartido para a humanidade.
Figura 5:O novo reactivo de coronavirus de Liming Bio-Products Co., Ltd. obtivo o certificado de rexistro CE da UE
O certificado honorífico
Houshenshan
Figura 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. apoiou o Wuhan Vulcan (HouShenShan) Mountain Hospital para loitar contra a epidemia de COVID-19 e recibiu o certificado honorífico da Cruz Vermella de Wuhan.O hospital de montaña de Wuhan Vulcan é o hospital máis famoso de China especializado no tratamento de pacientes graves con COVID-19.
Mentres o novo brote de coronavirus segue estendéndose por todo o mundo, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. está a dar un paso atrás para apoiar e axudar ás comunidades de todo o mundo coas nosas tecnoloxías innovadoras para loitar contra esta ameaza global sen precedentes.As probas rápidas da infección por COVID-19 son unha parte fundamental para abordar esta ameaza.Seguimos contribuíndo de forma significativa proporcionando plataformas de diagnóstico de alta calidade en mans dos traballadores sanitarios de primeira liña para que as persoas poidan recibir os resultados das probas críticas que necesitan.Os esforzos de Liming Bio-products Co., Ltd. na batalla contra a pandemia de COVID-19 consisten en achegar as nosas tecnoloxías, experiencias e coñecementos ás comunidades internacionais para a construción dunha comunidade global de destino.
Preme longamente ~ Escanear e síguenos
Correo electrónico: sales@limingbio.com
Páxina web: https://limingbio.com
Hora de publicación: maio-01-2020
