Cal é o mellor método?
—Probas para o diagnóstico da infección por SARS-CoV-2
Para os casos confirmados de COVID-19, os síntomas clínicos comúns informados inclúen febre, tose, mialxia ou fatiga.Non obstante, estes síntomas non son características únicas da COVID-19 porque estes síntomas son similares aos doutras enfermidades infectadas polo virus, como a gripe.Actualmente, a PCR en tempo real do ácido nucleico do virus (rt-PCR), a TC e algúns parámetros de hematoloxía son as ferramentas principais para o diagnóstico clínico da infección.O CDC chinés desenvolveu e utilizou moitos kits de proba de laboratorio para probar mostras de pacientes para a COVID-191, CDC dos EUA2e outras empresas privadas.A proba de anticorpos IgG/IgM, un método de proba serolóxica, tamén se engadiu como criterio diagnóstico na versión actualizada de China das directrices de diagnóstico e tratamento da nova enfermidade por coronavirus (COVID-19), que se publicou o 3 de marzo.1.A proba rt-PCR do ácido nucleico do virus aínda é o método de diagnóstico estándar actual para o diagnóstico de COVID-19.
StrongStep®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2)Kit de PCR en tempo real múltiple (detección de tres xenes)
Non obstante, estes kits de proba de PCR en tempo real, que buscan material xenético do virus, por exemplo en hisopos nasais, orais ou anais, padecen moitas limitacións:
1) Estas probas teñen longos tempos de resposta e son complicadas no seu funcionamento;xeralmente tardan de media entre 2 e 3 horas en xerar resultados.
2) As probas de PCR requiren laboratorios certificados, equipos caros e técnicos adestrados para operar.
3) Hai algúns números de falsos negativos para a rt-PCR de COVID-19.Pode deberse á baixa carga viral do SARS-CoV-2 no espécimen de hisopo respiratorio superior (o novo coronavirus infecta principalmente as vías respiratorias inferiores, como os alvéolos pulmonares) e a proba non pode identificar as persoas que pasaron por unha infección, se recuperaron e eliminaron o virus dos seus corpos.
Investigación de Lirong Zou et al4descubriu que se detectaron cargas virais máis altas pouco despois do inicio dos síntomas, detectando cargas virais máis altas no nariz que na gorxa e o patrón de derrame de ácido nucleico viral dos pacientes infectados con SARS-CoV-2 aseméllase ao dos pacientes con gripe.4e parece diferente do observado en pacientes infectados con SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5Examinaron mostras en serie (estubos de garganta, esputo, ouriños e feces) de dous pacientes en Pequín e descubriron que as cargas virais nos cotonetes e nas mostras de esputo alcanzaron un máximo de 5 a 6 días despois do inicio dos síntomas, as mostras de esputo xeralmente mostraban cargas virales máis altas que mostras de hisopos de garganta.Non se detectou ARN viral nas mostras de orina ou feces destes dous pacientes.
A proba de PCR só dá un resultado positivo cando o virus aínda está presente.As probas non poden identificar as persoas que pasaron por unha infección, se recuperaron e eliminaron o virus dos seus corpos.En realidade, só un 30%-50% foi positivo para PCR en pacientes con pneumonía por novo coronavirus diagnosticada clínicamente.Moitos pacientes con pneumonía por coronavirus non poden ser diagnosticados por mor dunha proba de ácido nucleico negativa, polo que non poden recibir o tratamento correspondente a tempo.Desde a primeira ata a sexta edición das directrices, baseándose unicamente no diagnóstico dos resultados das probas de ácido nucleico, o que causou grandes problemas aos médicos. O primeiro "denunciante", o doutor Li Wenliang, oftalmólogo da Wuhan Central Hospital, está morto.Durante a súa vida fíxoselle tres probas de ácidos nucleicos no caso de febre e tose, e a última vez obtivo resultados positivos en PCR.
Despois da discusión dos expertos, decidiuse aumentar os métodos de proba do soro como novo criterio diagnóstico.Aínda que as probas de anticorpos, tamén chamadas probas serolóxicas, poden confirmar se alguén estaba infectado mesmo despois de que o seu sistema inmunitario eliminase o virus que causa a COVID-19.
Proba rápida de anticorpos StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM
A proba de anticorpos IgG/IgM axudará a rastrexar dunha forma moito máis poboacional quen tivo a infección, porque moitos casos parecen transmitirse a partir de pacientes asintomáticos que non se poden identificar facilmente.Unha parella en Singapur, o marido deu positivo por PCR, o resultado da proba de PCR da súa muller foi negativo, pero os resultados da proba de anticorpos mostraron que tiña anticorpos, igual que o seu marido.
Os ensaios serolóxicos deben ser validados coidadosamente para asegurarse de que reaccionan de forma fiable, pero só aos anticorpos contra o novo virus.Unha preocupación foi que a semellanza entre os virus que causan a síndrome respiratoria aguda grave e a COVID-19 podería levar a unha reactividad cruzada.A IgG-IgM desenvolvida por Xue Feng wang6considerouse que se pode usar como proba no punto de atención (POCT), xa que se pode realizar preto da cabeceira con sangue de dedo.O kit ten unha sensibilidade do 88,66% e unha especificidade do 90,63%.Non obstante, aínda houbo resultados falsos positivos e falsos negativos.
Na versión actualizada de China da directriz de diagnóstico e tratamento da nova enfermidade por coronavirus (COVID-19)1, os casos confirmados defínense como casos sospeitosos que cumpren algún dos seguintes criterios:
(1) As mostras do tracto respiratorio, as mostras de sangue ou feces resultaron positivas para o ácido nucleico SARS-CoV-2 mediante rt-PCR;
(2) A secuenciación xenética do virus a partir de mostras de mostras de tracto respiratorio, sangue ou feces é moi homóloga co SARS-CoV-2 coñecido;
(3) Os anticorpos IgM e anticorpos IgG específicos do novo coronavirus no soro foron positivos;
(4) Os anticorpos IgG específicos do novo coronavirus séricos cambiados de negativo a positivo ou anticorpos IgG específicos de coronavirus durante o período de recuperación son 4 veces máis altos que durante o período agudo.
Diagnóstico e tratamento da COVID-19
| Directrices | Publicado | Criterios diagnósticos confirmados |
| Versión 7 | 3 de marzo de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versión 6 | 18 de febreiro de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referencia
1. Directrices para o diagnóstico e tratamento da pneumonía por novo coronavirus (versión de proba 7, Comisión Nacional de Saúde da República Popular China, publicada o 3 de marzo de 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Investigación Use só o protocolo RT-PCR en tempo real para a identificación de 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur reclama o primeiro uso da proba de anticorpos para rastrexar as infeccións por coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.Carga viral do SARS-CoV-2 en mostras de vías respiratorias superiores de pacientes infectados 19 de febreiro de 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5.Cargas virales de SARS-CoV-2 en mostras clínicas Lancet Infect Dis 2020 Publicado en liña o 24 de febreiro de 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Desenvolvemento e aplicación clínica dunha proba rápida de anticorpos combinados IgM-IgG para SARS-CoV-2
Diagnóstico da infección XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Hora de publicación: 17-mar-2020
